產(chǎn)品概述
白細(xì)胞介素10(IL-10)剛發(fā)現(xiàn)時(shí)被命名為細(xì)胞因子合成抑制劑,是一個(gè)多功能的細(xì)胞因子能夠通過(guò)激活Th1細(xì)胞、天然殺傷細(xì)胞、單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞從而抑制許多細(xì)胞因子的產(chǎn)生,包括IL-1、GM-CSF、TNF、IL-6、IL-8、IL-12和IFN-γ。IL-10表明也能夠抑制巨噬細(xì)胞細(xì)胞毒性活力,同時(shí)能夠刺激B細(xì)胞,肥大細(xì)胞和胸腺T細(xì)胞的增殖和分化。小鼠的IL-10是通過(guò)一系列細(xì)胞產(chǎn)生的,包括活化的Th2細(xì)胞、初生胸腺細(xì)胞、單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、角化細(xì)胞、B細(xì)胞和神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞。小鼠的IL-10cDNA能編碼178個(gè)氨基酸的帶有一段疏水信號(hào)序列的前體多肽,當(dāng)這段信號(hào)序列被切割后,能產(chǎn)生含有160個(gè)氨基酸殘基的成熟蛋白質(zhì)。在氨基酸序列水平,小鼠和大鼠,小鼠和人的IL-10都有73%的序列同源性。盡管人的IL-10對(duì)小鼠的細(xì)胞是有活力的,但小鼠的IL-10對(duì)人的細(xì)胞沒(méi)有顯示出種屬的交叉反應(yīng)性。
產(chǎn)品原理
本實(shí)驗(yàn)采用雙抗體夾心ELISA法??剐∈驣L-10單抗包被于酶標(biāo)板上,同時(shí)加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品和生物素化的抗小鼠IL-10抗體,標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品中的IL-10會(huì)與加入于孔中的生物素化的抗小鼠IL-10抗體及包被于酶標(biāo)板上的單抗結(jié)合,形成免疫復(fù)合物,游離的成分被洗去;加入辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的親合素,親合素與生物素特異性結(jié)合,游離的成分被洗去。加入顯色底物(顯色劑),若反應(yīng)孔中有IL-10,辣根過(guò)氧化物酶會(huì)使無(wú)色的顯色劑變藍(lán),加終止液變黃。在450nm處測(cè)OD值,IL-10濃度與OD450值之間呈正相關(guān),可通過(guò)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出標(biāo)本中IL-10濃度。