與原核細(xì)胞、酵母細(xì)胞以及昆蟲細(xì)胞相比，中國倉鼠卵巢細(xì)胞（CHO）作為宿主細(xì)胞表達(dá)的外源蛋白最接近其天然構(gòu)象，因而CHO細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)是生物工程制藥最為理想的表達(dá)系統(tǒng)。在CHO細(xì)胞中表達(dá)治療性蛋白對于商業(yè)化的藥物生產(chǎn)十分經(jīng)濟(jì)方便，但是這類產(chǎn)品的生產(chǎn)以及純化過程有可能會帶來CHO宿主細(xì)胞蛋白（CHO HCP）殘留的污染，這些殘留的蛋白污染會降低藥物治療效果，造成副作用或者免疫反應(yīng)，因此要對CHO HCP的殘留量進(jìn)行控制?！吨腥A人民共和國藥典》2020年版三部建議HCP采用酶聯(lián)免疫吸附測定（ELISA）方法檢測。本產(chǎn)品是一種雙抗夾心ELISA試劑盒，所使用的抗體來自兔和羊的混合抗體，抗原為CHO細(xì)胞的發(fā)酵上清收集液（細(xì)胞培養(yǎng)基不含蛋白），本產(chǎn)品用于多種CHO宿主細(xì)胞表達(dá)產(chǎn)物的純化工藝開發(fā)、過程控制、成品放行等。 首次使用本試劑盒前建議先完成產(chǎn)品的適用性研究，確認(rèn)樣本基質(zhì)是否存在干擾以及合適的樣本檢測稀釋條件。 產(chǎn)品特點(diǎn) 1、定量范圍：1.0~250 ng/mL； 2、靈敏度：CHO HCP檢測下限（LOD）不高于0.5ng/mL，定量下限：1.0ng/mL； 3、精密度：定量限范圍內(nèi)板內(nèi)、板間樣本濃度變異系數(shù)均<20%； 4、專屬性：E.coli，293T，Vero等細(xì)胞上清以及非CHO表達(dá)的人源IgG樣本中測定的CHO HCP濃度均低于檢測下限； 產(chǎn)品優(yōu)勢 試劑盒溯源體系完善 組分（校準(zhǔn)品、抗體）自主制備開發(fā)，原料自主可控，試劑盒溯源體系完善； HCP制備工藝有代表性 選用具有代表性的CHO-S，CHO-K1細(xì)胞株；模擬重組抗體制備工藝，采用分泌上清形式； 特異性高 覆蓋率高達(dá)84%；包含絕大部分CHO HCP（近2000種HCP），抗體能夠識別抗原中的常見風(fēng)險(xiǎn)HCP 69種；其中高風(fēng)險(xiǎn)HCP占比22種 操作簡單，結(jié)果穩(wěn)定 即用型校準(zhǔn)品，避免標(biāo)曲稀釋差異導(dǎo)致的檢測結(jié)果差異；一步法設(shè)計(jì)，操作簡單快捷 供應(yīng)鏈安全 批產(chǎn)量大，貨期短，供貨穩(wěn)定；
CHO宿主蛋白殘留檢測試劑盒 性能指標(biāo) 結(jié)果 1.線性范圍 定量范圍 1.0~250 ng/mL PASS 四參數(shù)擬合R2 >0.99 PASS 2.準(zhǔn)確性 企業(yè)參考品偏差 RSD≤20% PASS 3.回收率 模擬樣本回收率 70%~130% PASS 4精密度 批內(nèi)差 CV≤15% PASS 批間差 CV≤20% PASS 5.特異性 與1μg/mL HEK 293T，E.coli，Vero等宿主蛋白均無交叉反應(yīng) PASS 6.干擾性 5 mg/mL人源IgG無干擾 PASS 7.定量上限 1.0 ng/mL PASS 8.定量下限 250 ng/mL PASS 9.耐用性 儀器適用性 MD SpectraMax i3x/BioTek ELx800/ Thermo Fish Multiskan TM SkyHigh PASS 10.穩(wěn)定性 有效期 2~8℃保存12月 PASS
ResiQuant® CHO HCP殘留檢測試劑盒-FAST（ELISA法）是通用型檢測試劑盒，主要用于定量檢測以CHO細(xì)胞系為宿主細(xì)胞表達(dá)生產(chǎn)的產(chǎn)品在生產(chǎn)過程中CHO 宿主蛋白的殘留，從而實(shí)現(xiàn)對 CHO HCP 的殘留量進(jìn)行控制。
